YOGYAKARTA - Le diabète est un défi mondial, et sa solution réside dans la biotechnologie. Nous examinons en détail les étapes de la technologie plasmide pour produire de l’insuline humaine qui est très importante pour des millions de patients à travers le monde.
al. Cet processus génétique transforme les bactéries ordinaires en usines d’insuline. Dans cet article, vous comprenez chaque étape scientifique du clone génique jusqu’au produit fini prêt à être injecté.
rénal : Avant de passer au processus principal, nous devons comprendre deux composantes essentielles, à savoir le plasmide et le gène insuline humain. Comme l’a rapporté le site Web de l’Université Monash, voici quelques explications importantes :
id est une petite molécule d’ADN circulaire trouvée dans les bactéries, agissant comme un vecteur (portateur) du gène. Pendant ce temps, le gène de l’insuline humaine est le segment de l’ADN qui apporte des instructions pour fabriquer la protéine insuline.
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rénal, parmi les autres, est une étape fondamentale, qui combine l’ADN souhaité (gènes d’insuline) avec le plasmide sélectionné pour former un nouvel outil génétique (recombinant placid). Voici les étapes clés :
sur le gène d’insuline humaine (ADN demandé) et choisissez le vecteur de plasmide. Ce plasmide doit contenir uneorigine de réplication (pour se doubler) et un marqueur sélectable (marcheur généralement sous la forme de gènes résistants aux antibiotiques).
Utilisant l’enzyme de restriction pour couper l’ADN des gènes insuline et de plasmides en séquence spécifique. Cette déduction produit des « fins adhésifs » complétés pour se jumeler.
rénage d’ADN du gène insuline et du plasmide qui ont été coupés est mélangé dans un tube de réaction.
ate enzyme ADN de Ligase est ajouté pour attacher les fragments du gène de l’insuline dans le plasmide. Ce processus forme un lien covalène fort (leiage phosphodiéster) et naît le plasmide recombinant.
Une fois le plasmide recombinant formé, la prochaine étape sera de le mettre dans les cellules hôtes (habituellement la bactéérie E. coli). Ce processus s’appelle transformation.
rénal : Cependant, toutes les bactéries ne reçoivent pas ce massacre, mais nécessitent des traitements spéciaux :
rénal, qui est mélangé à l’ADN, est ensuite soumis pour une brève période d’augmentations soudaines de température. Cela crée une petite ouverture dans la membranne cellulaire bactérienne, permettant d’entrer le plasmide recombinant.
rénal. Cette courte courte courte électrochocs perturbe les membranes cellulaires, facilitant l’entrée du plasmide.
Les cellules sont traitées avec des produits chimiques (comme le cloride de calcium) pour rendre leurs membranes cellulaires plus permeables.
rénité : Étant donné que toutes les bactéries ne se transformeront pas avec succès, les scientifiques doivent identifier et sélectionner seuls les bactéries qui ont réussi à prendre le bon plasmide recombinant.
rénal est effectué en utilisant un marqueur évaluable dans le plasmide, qui est un gène résistant aux antibiotiques (par exemple, la résistance à l’ampicilline) à l’aide d’antibiotiques,
rénal, les bactéries qui ont été transformées sont développées dans le milieu afin qu’elles contenent des antigéniques. Seules les bactéries qui ont réussi à prendre des plasmides (et des gènes de résistance) survivront et passent à des colonies.
Une fois les cellules qui ont été transformées avec succès identifiées, ces bactéries sont transformées pour produire de l’insuline, par la méthode suivante :
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